Trang 1
HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM KHOA CÔNG NGHỆ SINH HỌC -------------------- KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐỀ TÀI: ĐÁNH GIÁ ĐA DẠNG DI TRUYỀN CỦA MỘT SỐ MẪU GIỐNG SEN (NELUMBO NUCIFERA GAERTN.) BẰNG CHỈ THỊ RAPD VÀ ISSR Hà Nội - 2023
Nội dung tài liệu
Trang 2
HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM KHOA CÔNG NGHỆ SINH HỌC -------------------- KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐỀ TÀI: ĐÁNH GIÁ ĐA DẠNG DI TRUYỀN CỦA MỘT SỐ MẪU GIỐNG SEN (NELUMBO NUCIFERA GAERTN.) BẰNG CHỈ THỊ RAPD VÀ ISSR Người thực hiện : Nguyễn Thanh Thảo Mã sinh viên : 642224 Khoá : K64-CNSHA Chuyên ngành : Công nghệ sinh học Giáo viên hướng dẫn : TS. Đinh Trường Sơn Hà Nội - 2023
Trang 3
LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan khóa luận tốt nghiệp “Đánh giá đa dạng di truyền của một số mẫu giống sen (Nelumbo nucifera Gaertn.) bằng chỉ thị RAPD và ISSR” là công trình nghiên cứu của riêng tôi dưới sự hướng dẫn của TS. Đinh Trường Sơn. Các nội dung nghiên cứu, các số liệu và kết quả nghiên cứu này là trung thực và chưa từng được công bố trong bất kì một công trình nào. Nếu phát hiện bất kì sự gian lận nào tôi xin chịu hoàn toàn trách nhiệm. Trong quá trình nghiên cứu và thực hiện khóa luận, tôi đã kế thừa những thành tựu của các nhà khoa học với sự trân trọng và biết ơn sâu sắc. Hà Nội, ngày 12 tháng 2 năm 2023 Sinh viên thực hiện Nguyễn Thanh Thảo i
Trang 4
LỜI CẢM ƠN Khoá luận tốt nghiệp với đề tài “Đánh giá đa dạng di truyền của một số mẫu giống sen (Nelumbo nucifera Gaertn.) bằng chỉ thị RAPD và ISSR” là kết quả của quá trình cố gắng của bản thân cùng với sự giúp đỡ tận tình, động viên khích lệ của thầy cô, bạn bè và người thân. Qua đây, em xin gửi lời cảm ơn chân thành đến những người đã giúp đỡ em trong thời gian học tập – nghiên cứu khoa học vừa qua. Em xin trân trọng gửi đến thầy TS. Đinh Trường Sơn, người đã trực tiếp tận tình hướng dẫn cũng như cung cấp tài liệu, thông tin khoa học cần thiết cho bài luận này lời cảm ơn chân thành và sâu sắc nhất. Em xin cảm ơn quý thầy, cô giáo Bộ môn Công nghệ sinh học Thực vật – Khoa Công nghệ sinh học đã tạo điều kiện tốt nhất và giúp đỡ em trong suốt quá trình thực hiện khoá luận tốt nghiệp. Em xin bày tỏ lời cảm ơn sâu sắc đến Viện Nghiên cứu Rau quả đã cung cấp mẫu giống sen để em thực hiện tốt đề tài. Cuối cùng, em xin gửi lời cảm ơn tới gia đình, bạn bè, người thân đã luôn bên cạnh ủng hộ, khích lệ tinh thần giúp em hoàn thành khoá luận tốt nghiệp. Do giới hạn kiến thức và khả năng lý luận của bản thân còn nhiều thiếu sót và hạn chế, kính mong sự chỉ dẫn và đóng góp của các thầy, cô để bài luận của em được hoàn thiện hơn. Em xin chân thành cảm ơn! Hà Nội, ngày 12 tháng 2 năm 2023 Sinh viên thực hiện Nguyễn Thanh Thảo ii
Trang 5
MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN ..............................................................................................i LỜI CẢM ƠN ...................................................................................................ii DANH MỤC BẢNG........................................................................................vi DANH MỤC HÌNH........................................................................................vii DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT............................................................viii TÓM TẮT ........................................................................................................ix MỞ ĐẦU...........................................................................................................1 A. Đặt vấn đề................................................................................................1 B. Mục tiêu và yêu cầu.................................................................................2 a. Mục tiêu................................................................................................2 b. Yêu cầu.................................................................................................2 Chương 1. TỔNG QUAN TÀI LIỆU ...............................................................3 1.1. Tổng quan về cây sen ...........................................................................3 1.1.1. Nguồn gốc và phân loại..................................................................3 1.1.1.1. Nguồn gốc................................................................................3 1.1.1.2. Phân loại và phân bố................................................................4 1.1.2. Đặc điểm sinh học của cây sen ......................................................5 1.1.3. Giá trị cây sen.................................................................................8 1.1.3.1. Giá trị dinh dưỡng....................................................................8 1.1.3.2. Giá trị y học..............................................................................9 1.1.3.3. Giá trị văn hóa, thẩm mỹ........................................................11 1.1.4. Tình hình nghiên cứu cây sen trên thế giới và ở Việt Nam.........12 iii
Trang 6
1.1.4.1. Tình hình nghiên cứu cây sen trên thế giới............................12 1.1.4.2. Tình hình nghiên cứu cây sen ở Việt Nam............................13 1.2. Chỉ thị phân tử và ứng dụng chỉ thị phân tử trong phân tích đa dạng di truyền ..................................................................................................14 1.2.1. Khái niệm chỉ thị phân tử.............................................................14 1.2.2. Chỉ thị DNA - Chỉ thị RAPD.......................................................16 1.2.3. Chỉ thị DNA - Chỉ thị ISSR .........................................................17 1.3. Một số nghiên cứu đa dạng di truyền của các chủng giống sen.........18 Chương 2. VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU ......................21 2.1. Đối tượng, địa điểm và thời gian nghiên cứu.....................................21 2.2. Vật liệu dùng trong nghiên cứu..........................................................21 2.3. Hóa chất và thiết bị dùng trong nghiên cứu .......................................25 2.4. Nội dung và phương pháp nghiên cứu ...............................................26 2.4.1. Nội dung nghiên cứu....................................................................26 2.4.2. Phương pháp nghiên cứu..............................................................26 2.4.2.1. Tách chiết DNA tổng số ........................................................26 2.4.2.2. Phương pháp thực hiện phản ứng PCR..................................28 2.4.2.3. Điện di trên gel agarose .........................................................29 2.4.2.4. Phương pháp đánh giá và xử lí số liệu...................................29 Chương 3. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN ......................................................31 3.1. Kết quả tách chiết DNA tổng số.........................................................31 3.2. Phân tích đa dạng di truyền bằng chỉ thị RAPD ................................33 3.3. Phân tích đa dạng di truyền bằng chỉ thị ISSR...................................44 iv
Trang 7
3.4. Phân tích đa dạng di truyền bằng chỉ thị RAPD và ISSR..................54 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ.........................................................................60 A. Kết luận..................................................................................................60 B. Kiến nghị................................................................................................60 TÀI LIỆU THAM KHẢO...............................................................................61 PHỤ LỤC........................................................................................................68 v
Trang 8
DANH MỤC BẢNG Bảng 1.1. Giá trị dinh dưỡng trong 100g củ sen và hạt sen..............................8 Bảng 2.1. Danh sách 30 mẫu giống sen nghiên cứu.......................................21 Bảng 2.2. Danh sách chỉ thị phân tử RAPD sử dụng trong nghiên cứu .........24 Bảng 2.3. Danh sách chỉ thị phân tử ISSR sử dụng trong nghiên cứu............25 Bảng 2.4. Thành phần phản ứng PCR.............................................................28 Bảng 2.5. Chu kỳ nhiệt của phản ứng PCR ....................................................28 Bảng 3.1. Kết quả đo hàm lượng DNA trong 30 mẫu sen nghiên cứu...........31 Bảng 3.2. Kết quả phân tích của 10 mồi RAPD .............................................34 Bảng 3.3. Giá trị PIC và Rp của 10 mồi RAPD..............................................35 Bảng 3.4. Hệ số tương đồng di truyền của 30 mẫu sen dựa trên chỉ thị RAPD .......................................................................................................41 Bảng 3.5. Kết quả phân tích của 10 mồi ISSR................................................45 Bảng 3.6. Giá trị PIC và Rp của 10 mồi ISSR................................................46 Bảng 3.7. Hệ số tương đồng di truyền của 30 mẫu sen dựa trên chỉ thị ISSR51 Bảng 3.8. Hệ số tương đồng di truyền của 30 mẫu sen phân tích bởi kết hợp hai chỉ thị RAPD và ISSR.............................................................56 vi
Hiển thị 8 trang đầu. Tải tài liệu để xem đầy đủ.
Bình luận (0)
Chưa có bình luận nào. Hãy là người đầu tiên!